簡要描述：耐藥性是一種因ATP結合盒式（ATP Binding Cassette，ABC）膜轉運蛋白家族上調介導所產生的現象。ABC轉運蛋白的過度表達了加速有毒物質從細胞中的去除，例如hual劑從腫瘤細胞中排出，或抗生素從耐藥菌株中排出。Enzo的EFLUXX-ID® 多藥耐藥性檢測試劑盒可實現同時對三種臨床相關的 ABC 轉運蛋白的功能檢測：包括MDR1（p-糖蛋白）、MRP1/2 和 BCRP。
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個月 |
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EFLUXX-ID® multidrug resistance assay kit
多藥耐藥性檢測試劑盒——監測三種ABC轉運蛋白
簡單免洗檢測，可同時監測3種耐藥性相關的ABC轉運蛋白
耐藥性是一種因ATP結合盒式（ATP Binding Cassette，ABC）膜轉運蛋白家族上調介導所產生的現象。
ABC轉運蛋白的過度表達了加速有毒物質從細胞中的去除，例如hualiao劑從腫瘤細胞中排出，或抗生素從耐藥菌株中排出。
Enzo的EFLUXX-ID® 多藥耐藥性檢測試劑盒可實現同時對三種臨床相關的 ABC 轉運蛋白的功能檢測：包括MDR1（p-糖蛋白）、MRP1/2 和 BCRP。
◆特點
● 簡單免洗的操作步驟，結果可在1小時內獲得
● 可檢測與3種ABC轉運蛋白（MDR1（p-糖蛋白）、MRP1/2和BCRP）活性相關的耐藥性
● 通過單一專用染料可定量檢測活細胞中的多藥耐藥性（MDR）活性，并以MDR 活性因子（MAF）表征
● 試劑盒內含有三種已知的MDR1（p-糖蛋白）、MRP1/2和BCRP蛋白特異性抑制劑
● 可檢測Calcein AM染料無法檢測的BCRP蛋白活性
● 有綠色、金色兩種熒光染料可供選擇
● 兩種染料均可與表達GFP的細胞系或其他CELLESTIAL® 染料同時使用
◆作用機制
EFLUXX-ID®使用了一種疏水性非熒光化合物，這種化合物容易穿透細胞膜，經細胞內酯酶水解成親水性熒光染料。除非EFLUXX-ID® 染料被泵出至細胞外，否則酯酶裂解的染料會一直存在于細胞內。因此，表現出耐藥性的細胞將染料主動運輸泵出胞外，會出現熒光減弱的現象。EFLUXX-ID® 檢測是目前少有可同時監測三種主要的ABC轉運蛋白并能夠分析單泵活性的試劑盒。
熒光團 | 兼容的EFLUXX-ID® 試劑 |
Cy 3 & Cy 5的偶聯物、Pl、7-AAD、APC、Texas Red、 RFP、YFP、TAMRA、UV和Violet 染料 | EFLUXX-ID® 綠色熒光染料 |
GFP/eGFP、RFP、PI、7-AAD、APC、Cy 5的偶聯物、 Rhodamine 123、Texas Red、UV和Violet 染料 | EFLUXX-ID® 金色熒光染料 |
表1：EFLUXX-ID® 多藥耐藥性染料與其他熒光染料的兼容性
圖1：對三種主要ABC轉運蛋白的活性進行檢測。使用EFLUXX -ID Green（上）、Gold（中）或Calcein AM（下）染料，通過流式細胞術評估CHO K1細胞中ABC轉運蛋白的活性。與未處理的細胞相比，用ABC轉運蛋白特異性抑制劑（圖中陰影部分）處理可誘導染料保留在細胞內（圖中實線部分）。平均熒光強度（MFI）的差異表明了對應蛋白的活性，在圖中通過多藥耐藥性活性因子值（MAF）進行表征。更高的MAF值表明EFLUXX-ID染料對抑制劑有著良好的特異性。而Calcein AM染料的低MAF值表明其（常用的MDR檢測探針）無法檢測BCRP活性。
圖2：使用EFLUXX-ID® Green和EFLUXX-ID® Gold染料在CHO K1細胞中評估已知抑制劑對ABC轉運蛋白活性的結果分析。將細胞與試劑盒中含有的MDR普通抑制劑（左一）、轉運蛋白特異性抑制劑在37°C下孵育5 min。隨后在37°C下用指定的染料染色細胞30 min，并立即利用流式細胞術進行分析。所用抑制劑：5 µM環胞霉素 A（MDR普通抑制劑）、20 µM維拉帕米（P-gp特異性抑制劑）、0.05 mM MK-571（MRP特異性抑制劑）、0.05 mM新生霉素（BCRP特異性抑制劑）。
圖3：EFLUXX-ID® Green 490/514 nm ex/em和Gold 530/570 nm ex/em 試劑的光譜特性可與其他常見的熒光染料進行多重檢測。
◆產品詳情
應用 | 流式細胞術，熒光顯微鏡 |
應用說明 | EFLUXX-ID® 多藥耐藥性檢測試劑盒可對活細胞（懸浮細胞和貼壁細胞）中的耐藥表型進行檢測和分析。 |
品質baozheng | 每批次EFLUXX-ID® Gold耐藥檢測試劑盒的樣品試劑盒均已按照操作手冊中的步驟，對第5代和第20代間的 CHO K1細胞系進行染色。獲得的結果如下： 1. 維拉帕米介導的抑制后MAF>80 2. MK-571介導的抑制后MAF>60 3. 新生霉素介導的抑制后MAF>40 |
包裝 | 100 assays（流式細胞術） |
使用/穩定性 | 自交貨后，試劑盒組分在適當的儲存條件下可穩定保存一年。 |
儲存條件 | 避光。避免反復凍融。 |
運輸條件 | 藍冰運輸 |
短期儲存 | -20°C |
長期儲存 | -80°C |
組分 | 2 瓶，EFLUXX-ID® Gold或EFLUXX-ID® Green檢測試劑 300 nmoles，MDR1 抑制劑（維拉帕米） 750 nmoles，MRP 抑制劑（MK-571） 1.5 µmoles，BCRP 抑制劑（新生霉素） 500 µL，碘化丙啶 |
科學背景 | 耐藥性是一種由跨膜ATP結合盒（ATP Binding Cassette ，簡稱ABC）轉運蛋白家族上調介導的現象。 ABC轉運蛋白的過表達加速了毒性劑從細胞中去除，例如hualiao劑從腫瘤細胞中流出，或抗生素從耐藥菌株中流出。 |
監管狀態 | RUO - 僅供研究用 |
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| ENZ-51029-K100 | EFLUXX-ID® Green multidrug resistance assay kit 藥檢測試劑盒（綠色熒光） | 1 Kit | - | - |
| ENZ-51030-K100 | EFLUXX-ID® Gold multidrug resistance assay kit EFLUXX-ID® 耐藥檢測試劑盒（金色熒光） | 1 Kit | - | - |
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