mESF 小鼠ES基礎培養基 / mESF 添加物

mESF基礎培養基/mESF添加物

用于小鼠ES細胞培養的無血清培養基

　　本產品是用于小鼠ES細胞培養的無血清培養基。只需在基礎培養基中添加mESF 添加物和LIF后即可進行小鼠ES細胞培養。使用時無需添加 FBS 或血清代替品，同時無需使用飼養層細胞。

◆產品

●　mESF基礎培養基（編號No. 136-17805）

●　mESF添加物（編號No. 299-73301）

●　mESF Supplement A 5ml×1
●　mESF Supplement B 5ml×1（含有 0.0078% 2-mercaptoethanol）

◆特點

●　無需FBS 和血清代替品（無血清培養基）

●　無需飼養層細胞

●　低濃度 LIF 下也能維持未分化能力

◆使用方法

●　往 mESF 基礎培養基全量加入各種 mESF Supplement及LIF。

※注　直接將mESF 從現在使用中的培養基移出時，成功移植細胞數量有可能性減少。因此，請播種比移植時更多的細胞。此外，若不擅長直接移植，請按照以下順序進行馴化。

　?、俨シN細胞時，將使用中的培養基與mESF 培養基以1：1的比例混合。

　　②在后面的移植階段，將使用中的培養基與mESF 培養基以1：3、 1：7的比例混合，依次增加mESF培養基的用量。

◆小鼠ES細胞D3細胞系的培養

　　使用本產品培養小鼠 ES細胞 D3細胞系傳代至第５代，觀察到細胞形態、細胞繁殖能力、未分化標記物。

◆細胞形態

　　觀察到具有小鼠 ES細胞te有光澤的細胞集落。

◆細胞繁殖曲線

　　使用本產品后的繁殖曲線如下圖。

（培養基組成）
　　ｍESF 基礎培養基 + 各 mESF Supplement + 1,000units/ml StemSure^® LIF

（細胞播種數）

　　7,000 cells/well　

（使用骨膠原蛋白涂層處理12孔板）　

◆觀察到未分化標記物

　　各種未分化標記物（Nanog, Sox2, Oct3/4, SSEA-1）呈陽性。

 ◆低濃度LIF下的小鼠ES細胞D3細胞系培養

　　在低濃度LIF下（250, 500units/ml）培養了小鼠ES細胞D3細胞系。

◆集落形態（ALP染色）?細胞繁殖曲線

　　細胞形態及細胞繁殖曲線如下圖。 

（培養基組成）

　　ｍESF基礎培養基 + 各mESF Supplement + 250 or 500 or 1,000units/ml StemSure^® LIF

（細胞播種數）

　　7,000cells/well　

（使用骨膠原蛋白涂層處理12孔板）　

◆ALP染色陽性集落形成率

　　任何LIF濃度下的集落ALP染色幾乎都呈陽性。